免疫共沉淀(Co-IP)/Pull-down


  • Co-IP(免疫共沉淀)

  1. 免疫共沉淀(Co-immunoprocipitation,  Co-IP)  是检测蛋白质相互作用的经典技术,  是解析目标蛋白分子机制的第 一步骤。只有通过 Co-IP 确认两个 / 多个蛋白质存在互作,后续才能通过其他生物学手段解析互作的具体分子机制。   

  2. Co-IP 技术与质谱(LC-MS)技术结合,能高通量的鉴定和筛选靶蛋白在细胞中的相互作用网络,从而多层次解析靶 蛋白的分子机理,详情请参见谱璟科技“蛋白质-蛋白质互作—质谱分析”技术板块。

  3. 谱璟科技在Co-IP技术领域有丰富的技术积累,可开展多种不同类型的Co-IP实验。

Co-IP


  • Protein pull-down

  1. 免疫共沉淀(Co-immunoprocipitation,Co-IP)是检测蛋白质相互作用的经典技术,但是 Co-IP 无法证明两个 蛋白的互作是直接还是间接的。要证明两个蛋白直接相互作用,需要借助 pull-down 技术完成。

  2. 蛋白质 pull-down 技术流程包括(1)通过基因克隆,在 A 和 B 基因(A 和 B 基因分别编码两个待验证的互作蛋 白 A 和 B)上分别融合 GST 和 His 标签。(2)通过体外表达纯化系统如大肠杆菌、酵母等,分别纯化 GST-A 和 His-B 蛋白。(3)GST-A 和 His-B 蛋白体外孵育后,用 GST-beads 或者 His-beads 进行 pull-down,pull-down 产 物进行 western blot 检测。

Protein PD



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